Méthode et application de configuration de tampon de pH 10 Tromethamine Tris

Les avantages et les inconvénients de la méthode et de l'application de configuration de tampon de Tris

Le nom de produit chinois de Tris est aminomethane (hydroxyméthylique) de tris ; tromethamine ; tromethamine ; 2 amino-2- (hydroxyméthyliques) - 1,3-propanediol. C'est un cristal ou une poudre blanc. Soluble dans l'éthanol et l'eau, légèrement soluble en acétate éthylique et benzène, corrosifs aux produits chimiques de cuivre et en aluminium, et irritants.

Tris a un pouvoir tampon élevé, hydrosolubilité élevée, et est inerte à beaucoup de réactions enzymatiques, faisant à Tris un tampon très satisfaisant pour beaucoup de buts biochimiques. Généralement stabilisaient le pH du système de réaction, avec un pouvoir tampon fort entre pH 7.5-9.0.

Avantages de tampon de Tris :

①Puisque la base de Tris est fortement alcaline, ce système de tampon peut être employé pour préparer des tampons avec un large éventail de valeurs du pH s'étendant d'acide à alcalin ;

②Il a peu d'interférence au processus biochimique, et ne la précipite pas avec du calcium, des ions de magnésium et des ions de métaux lourds.

Inconvénients de tampon de Tris :

①Le pH du tampon est considérablement affecté par la concentration de la solution, le tampon est dilué dix fois, et le changement de pH est plus grand que 0,1 ;

②L'effet de température est grand, et le changement de température a une grande influence sur la valeur du pH de la solution tampon, △pKa/℃=-0.031, par exemple : le pH de la solution tampon à 4℃=8.4, puis au pH=7.4 à 37℃, ainsi à lui doit être de préparer à la température de l'utilisation. Le tampon Tris-HCL préparé à la température ambiante ne peut pas être utilisé à 0℃~4℃ ;

③Il est facile d'absorber le CO2 dans le ciel, ainsi le tampon préparé devrait être étroitement scellé ;

④Ce tampon exerce un certain effet d'interférence sur quelques électrodes de pH, ainsi une électrode compatible avec la solution de Tris devrait être employé.

Méthode de configuration de tampon de Tris :

Il y a deux manières de préparer le tampon Tris-HCL : préparez les solutions de HCL de 0,05 moles/l Tris et de 0,05 moles/l respectivement, et puis le mélange selon les volumes énumérés dans la table commune. Cependant, parce qu'il n'est pas facile préparer concentration standard d'acide chlorhydrique dilué, une autre méthode est utilisée généralement : Prenez à la configuration de 1 L la solution tampon de Tris-HCL de 0,1 moles/l comme exemple : pesez d'abord la base de 12,11 g Tris et se dissoudre dans l'eau mL~970 désionisée 950 par ml, tout en remuant, ajoutez le HCL de 4 N goutte-à-goutte, utilisez un compteur pH pour mesurer la valeur du pH de la solution à la valeur du pH désirée, et puis ajoutez l'eau pour composer à 1 L.

Gamme du tampon pH de Tris :

Le tampon de Tris est un tampon très utilisé dans la recherche biochimique. Sa gamme efficace utilisée généralement de pH est dans la gamme « neutre », comme :

Tampon Tris-HCL : pH=7.5~8.5

solution tampon de Tris-phosphate : pH=5.0~9.0

Application de solution tampon de Tris :

Dans le tampon d'électrophorèse, il forme un système de tampon avec de la glycine pour stabiliser le pH ; emploie le système du tampon Tris-HCL dans le gel pour stabiliser le pH ; il est très utilisé comme dissolvant pour les acides nucléiques et les protéines ; la basse concentration ionique du tampon de Tris peut également être employée pour la formation de nématodes des fibres intermédiaires ; ajoutez l'EDTA à la solution tampon d'acide chlorhydrique de Tris pour faire le « tampon de TE », qui peut être utilisé pour la stabilisation et le stockage d'ADN ; changez la solution acide de pH-ajustement en acide acétique pour obtenir le « tampon de TAE », remplacez-la par l'acide borique est disponible comme tampon de TBE. Ces deux tampons sont employés souvent dans des expériences acides nucléiques d'électrophorèse.